摘要
尿液分析是对正常和异常尿液成分的检查。在兽医临床是一种简单、便宜、但又非常重要的初步诊断检测方法。完整的尿液分析包括颜色、气味、浑浊度、体积、pH值、比重、蛋白质、葡萄糖、酮类、血液、红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、结晶和有机物等。半定量尿液分析与尿试纸条以及自动分析仪,可提供多种生化数据。如果操作严谨,几乎可以完全避免污染。但即便如此,也必须考虑污染的可能性。如果对干扰因素的了解有限,尿液分析的结果将是可疑的。在标准化尿液分析后,当结果与病史、临床表现和其他诊断试验结果相关时,可用于鉴别肾脏疾病和非肾脏疾病。本文阐述了犬猫尿液分析中不同操作的意义,如收集、储存、检查、分析的过程,以及结果误差的常见原因。关键字:犬,猫,诊断工具,疾病,尿液分析1
介绍
尿检是仅次于血常规和生化的临床实验室第三重要诊断筛查试验。是检查尿路疾病的发生、程度和持续时间的重要手段;也可用于体检,评估生理状态、体液平衡、全身疾病和有害问题;是在肾衰发生前诊断肾功能不全的最佳方法;有助于检测各种代谢性疾病,如通过估计血糖和酮类浓度,辅助诊断酮症和糖尿病;根据胆红素估计肝脏异常;以及根据血红蛋白浓度升高导致血管内溶血等。且易大量获取。尿液分析包括对物理特性、生化参数、尿沉渣和酶的评估。目前有专为兽医设计的尿液化学试纸、半自动和自动尿液分析仪。本文在查阅大量文献后,就尿液分析在某些疾病诊断中的重要性作一综述,以帮助兽医了解尿液分析在某些疾病诊断中的重要性。2
样本采集
动物准备只有了解患病动物之前的病史,才能准确地解读检测结果。需详细告知宠主可能的干扰因素,如饮食摄入、利尿剂、运动和其他干扰因素。外阴和邻近皮肤应用水、无菌海绵和消毒剂(如雌性和雄性宠物包皮区可使用洗必泰)彻底清洗,以避免感染和尿液分析结果的医源性改变。如有必要,可剪掉周边毛发。收集时间除非必要,很少考虑收集时间。肾小管检测建议使用晨尿,因为尿液在膀胱储存一夜,pH更低,可延长肾小管管型损坏时间。细菌培养和细胞形态评估建议使用新鲜尿液。若放置时间久可能产生微生物且细胞形态会改变。疑似疾病如尿路感染或肿瘤可以通过风干涂片进行诊断,新鲜尿液是诊断的先决条件。收集方式包括自由捕捉(自然排尿和膀胱手动挤压)、导尿和膀胱穿刺。自由捕捉直接收集动物排出的尿,导尿直接通过尿道抽取,膀胱穿刺需要使用无菌注射器抽取。每种方法各有利弊(详见表1),尿液微生物培养首选膀胱穿刺。样本处理和储存环境可以迅速改变尿液的各种性质,强烈建议尿液采集后60min内进行分析。如果需要送到实验室,应冷藏密封保存,以减少人为因素影响(表2),根据检测需要,最长可储存6h。在进行常规试纸分析之前,将冷藏样本复温,有助于沉淀物质的溶解。样品冷藏可能会增加鸟粪石和草酸钙结晶的数量,这是可逆的。因此,如果有必要检查这些结晶,则禁止冷藏。一些化学物质,如乙二胺四乙酸(EDTA)和福尔马林,可以用作尿液防腐剂,但正如作者所建议的,使用这种防腐剂时,应考虑转诊实验室的意见。每10mL尿液中加入4或5滴中性缓冲福尔马林,可保存尿细胞、管型和结晶,但这仅适用未染色的湿片。将尿液保存在EDTA抗凝管中有助于保持细胞细节,尤其是在需要进行风干尿液细胞学涂片评估时。不太常用的化学防腐剂包括百里酚、甲苯和硼酸,它们的使用与人工因素影响有关,这取决于它们的类型。3
尿液检查
完整的尿液检查包括尿液样本的宏观和微观检查。宏观检查相对快速、廉价和容易。包括对物理性质(颜色、气味、透明度和容量)和比重的主观评估。还包括半定量评估化学性质的尿液试纸分析。物理检查颜色尿液颜色是通过观察试管中的尿液在良好光线下的白色背景下或在尿液量筒中观察确定的。尿色素是尿胆色素和含肽尿胆原结合,形成尿液的颜色。在发热和饥饿时尿色素排泄增加,导致尿液颜色变深,尿液颜色和尿比重及液体摄入量相关。正常犬猫颜色是清澈的浅黄色、黄色、或黄褐色。颜色强度因尿液浓度、饮食、药物和动物的水合状态而有很大差异。浓缩尿呈深黄色而稀释尿呈淡黄色。异常成分的存在可能导致尿液颜色的不同(表3)。气味正常尿液有轻微的氨味,不过也取决于尿量。据悉猫的气味可以根据性别而有所不同。一些提示尿路感染的气味:氨(产生尿素酶的细菌),细菌降解的腐臭蛋白气味(血尿和血块),以及可能在变形杆菌引起的尿路感染中残留的硫化氢气味。酮病/酮症酸中毒动物的尿液中可能出现丙酮气味。但尿液气味不能被作为是某种特定疾病的特异性症状。清晰度/透明度/浑浊度混浊度可以通过在良好的光线下,尿液被置于透明的容器中,透过混合良好的尿液样本观察背景新闻纸的可视度半定量评估尿液的浑浊度。尿液通常是清澈的。精液、黏液、粪便和脂质可导致正常尿液混浊。细胞、结晶、管型或有机体数量的增加可能会增加疾病条件下的尿液混浊度。由于尿样温度和pH值的变化,会出现人工混浊。尿量尿量取决于机体的水合状态和肾脏的浓缩能力;尿量与比重成反比。正常猫:18-28mL/kg/d(幼猫5-60mL/kg/d),超过40mL/kg/d为多尿。正常犬:20-mL/kg/d。尿比重USG表示的是1L溶液与1L水的重量比,并反应了有关肾脏浓缩或稀释尿液的能力。渗透压比USG更精确,因为它只取决于溶液中颗粒物的数量(USG是溶液中颗粒物的数量、颗粒大小和分子量的混合物)。然而实际上,渗透压不容易计算,而USG可直接使用折射仪进行测量,包括自动折射仪。将一滴尿放在玻璃上的塑料盖下,在光源下直接观看数值。猫尿比人尿具有更高的折射率,因此当使用人用折射仪时,猫的USG会虚高约0.-0.,而人尿和犬的尿液折射率相同,健康犬猫的USG分别在1.-1.和1.-1.之间。解读USG的解读取决于多个因素。研究表明:影响USG的因素包括年龄、饮食、性别、禁食状态、饮水量、折射仪类型,性别和饮食之间的相互作用—增加饮食中的含水量只降低雌性猫的USG,大多数因素对USG的影响都很小。i.低渗尿(USG1.):是指稀释的尿液,其比重低于血浆和肾小球滤过液ii.高渗尿(USG1.):表明肾脏能够在一定程度上浓缩肾小球滤过液iii.等渗尿(USG1.-1.):指血浆和肾小球滤过液比重肾脏健康的脱水动物会排出少量高浓度尿液,USG增加。如果USG显示有等渗尿(犬USG1.,猫USG1.),则评估近期给药和评估血清肌酐和尿素氮浓度。正常参考值可能会误导USG,因为有许多变量。因此,对USG的理解应基于个体的健康状况和可改变USG干扰因素的认识。化学检查犬猫尿液化学性质(pH值、蛋白钙、咖啡碱、酮类、血红蛋白/隐血、胆红素等)可使用尿液化学试纸(尿试纸条)方便可靠地进行检测,进行半定量评估,其中一些必须根据USG折射计读数进行测量。尿试纸条的分析并不总是可靠的,假阳性或假阴性结果涉及到几种原因(表4)。用于USG、尿胆原、亚硝酸盐和白细胞的试纸条不用于动物。尿液pH值犬猫尿液正常pH值为6-7.5。如果动物系统酸碱失衡也会影响到尿液pH值。尿液pH值显示H+和HCO3-在肾脏系统中受控制;各种肾脏和肾外因素对其产生影响。导致酸性尿的原因:肌肉消耗、呼吸性和代谢性酸中毒、严重的呕吐、腹泻、恶心、发热、蛋白质分解代谢状态和尿酸化剂(氯化铵、高剂量抗坏血酸、柠檬酸和蛋氨酸)。导致碱性尿的原因:刚进食、低蛋白饮食、富含蔬菜和谷物的饮食、碱摄入(碳酸氢钠或柠檬酸盐)、产脲酶细菌(金黄色葡萄球菌、变形杆菌和克雷伯菌属)、肾小管酸中毒、代谢性和呼吸性碱中毒以及包括乙酰唑胺、碳酸氢钠、氯噻嗪,柠檬酸钾等药物的使用。检测前容器长时间敞开,会导致二氧化碳释放,也会造成人工因素碱性尿。pH的测量非常重要,需要一个准确的pH仪来正确测定pH值(尤其是在鲜亮的尿液中)。一项研究报告显示,尿试纸的检测结果比猫pH仪测得的结果低。蛋白健康的动物几乎不会排泄蛋白质,或低于常规尿蛋白检测的限度。肾小球的功能是作为一个过滤器,可以自由地过滤水和溶质,保留细胞和大多数大分子,如白蛋白和球蛋白。尿总蛋白可以用尿试纸、磺基水杨酸(SSA)或尿蛋白肌酐(UPC)比值测定。蛋白质试纸主要测量白蛋白。结果用痕迹(10mg/dL)、1(30mg/dL)、2(mg/dL)、3(mg/dL)或4(0mg/dL)表示。犬猫尿蛋白检测受尿液pH值的影响,而且由于猫尿中存在尿氨酸,假阳性反应很常见,尤其是在成年猫上。在犬猫的尿试纸法中也有大量的假阳性蛋白被报道。假阴性结果的可能原因是BenceJones蛋白尿、稀释尿、酸性尿。因此,这些半定量的蛋白质发现应该通过参考方法仔细解读和检查。尿蛋白试纸是一种敏感的(但不是很特异的)测试;阴性反应通常是可靠的,因此是一种有用的筛选测试。当尿液呈碱性可能会导致尿蛋白虚高,这时可通过另一种形式,如SSA,重新检查碱性尿阳性蛋白的结果。犬猫蛋白尿的可能原因可分为肾前性、肾性和肾后性。蛋白质的存在有助于蛋白质浓度较高时的浑浊度和沉淀。在试纸条中检测到的尿蛋白通常结合USG进行考虑,因为存在的任何蛋白质的浓度或稀释度与尿的浓度或稀释度直接相关。SSA试验应用于验证尿液分析中发现的蛋白,因为它特异性高。但敏感性低(容易出现假阴性),故SSA不适合用于蛋白尿筛查。UPC是蛋白尿检测的金标准,尿试纸条显示微量或痕迹蛋白或SSA检测阳性的患者都应进行UPC比值检测。单个随机尿液样本中尿蛋白与肌酐的比值与24h尿蛋白定量密切相关。健康犬的UPC0.5;超过1是异常的;0.5和1之间的值不确定,应检查其连续性或变化过程。葡萄糖如果血糖超过肾阈值或即使肾小管重吸收减少,尿液中也可能出现葡萄糖。试纸条通过一种酶的化学反应来检测葡萄糖,这种酶的化学反应导致的颜色变化与葡萄糖量成比例。过期试纸条结果可能假阴性。尿液温度会影响结果,因此冷藏样品需要复温。当犬的血糖水平超过mg/dl,猫的血糖水平超过-mg/dl时,通常会出现糖尿。糖尿的常见原因包括糖尿病、应激,尤其在猫和肾功能不全的动物。酮体尿液中低水平酮体通常检测不到。可用的检测包括硝普钠试剂试纸(化学试纸)和β-羟丁酸酮剂。酮是通过乙酰乙酸和硝普钠在碱存在下的尿反应进行评估。阳性反应是通过颜色的变化来检测的,从淡紫色到深紫色不等。所有硝普钠试剂条中均能检出丙酮和乙酰乙酸。但它们在检测乙酰乙酸时比丙酮敏感得多,所以大多数阳性反应是由乙酰乙酸引起的,而不是丙酮。酮尿症提示从碳水化合物代谢到脂肪代谢的改变。这种转变在患有继发于糖尿病的酮症的小动物身上最为明显,但饥饿也会导致酮类增加。这些情况受到代谢需求的影响,这些需求超出了碳水化合物代谢所能提供的水平。胆红素健康犬尿中可检测到少量胆红素,尤其是在稀释的尿液中。胆红素试纸垫通过化学反应检测胆红素,产生颜色变化,指示胆红素的含量。由于胆红素易被紫外线降解,尿液样本需避光。血液血尿(尿中存在完整的红细胞)或血红蛋白尿(由于溶解的红细胞)可显示为尿血阳性或骨骼肌损伤引起的肌红蛋白尿。这些原因可以通过检查尿沉渣、血常规和血清生化区分。尿液中的血液试纸条通过酶促化学过程检测含血红素的化合物,与存在的亚单位量相比,会导致颜色变化。在出现严重血尿的情况下,尿血和血红蛋白试纸的解释需谨慎,试纸可能无法可靠区分血尿和血红蛋白尿。现代化学试纸为尿液中重要化学成分的分析提供了简单方便的方法。在检查试剂条之前,需将样本回温。例如用于检测某些温度相关化学成分的试剂条上的酶反应。根据作者的建议,犬猫的尿液分析化学试纸与标准实验室结果不一致,不应考虑用于临床决策。尿检结果应与患者的其他相关参数和临床评估进行比较。一项旨在评估犬尿液中作为标准的干试剂条的研究不建议将其用于临床决策。另一项比较标准直接目测法和自动读数法的尿量试纸结果精确度的研究表明,由不同的检查者进行自动尿液分析的结果是精确的。显微镜检查尿液显微镜检查用湿片或风干涂片或两者兼有。在制备尿沉渣之后,以低倍(×10)对载玻片进行整体扫查,评估存在物质和样品制备的质量。在扫描过程中,检查者可以使用精细的焦点来评估悬浮在液体不同平面上的颗粒。高倍镜下(×40)评估细胞的数量和形态,并识别管型和结晶。我们可以通过将十个视野数相乘来计算这些中的每一个。细胞、管型和结晶被报告为每个高倍镜(HPF)或低倍镜的平均数。一项比较自动尿液分析仪和手动显微镜检测临床相关细胞和结晶数量的研究表明,对于大多数评估的尿液沉渣,自动尿液分析仪与手动显微镜的结果非常一致,但上皮细胞仍需改进。细胞红细胞在评估血尿时,重要的是通过显微镜检查红细胞的存在。在健康动物中,每个HPF最多可存在5个红细胞。尿液中长时间存在的红细胞会溶解。注意:稀释尿液(USG1.)或碱性尿液中的溶解加速,导致试纸上隐血测量呈阳性,但尿沉渣中没有明显的红细胞。这种结果可能被误诊为血管内溶血性血红蛋白尿。白细胞在健康动物中,每个HPF可能有5个白细胞。尿路感染可能与脓尿有关,每HPF的白细胞数5。白细胞在尿液中溶解,如果样品在室温下保存,一小时内可能减少50%。上皮细胞健康动物尿液中有少量上皮细胞,尤其是导尿管样本中的上皮细胞计数较低,可以使细胞变慢并替代新细胞。在未染色的湿片中,根据上皮细胞的大小很难区分上皮细胞。鳞状上皮细胞尿鳞状上皮细胞的来源可能包括皮肤、尿道远端、阴道或尿道前区。尿中鳞状细胞通常是由样本污染引起的,在临床上并不显著意义。移行上皮细胞正常尿液中会有少量移行上皮细胞,肾盂、输尿管、膀胱和近端尿道与移行上皮细胞呈线性关系。当使用导尿管采样、尿路感染、尿路结石时,样本的移行上皮细胞数量会增加。肾小管上皮细胞肾上皮细胞排列在肾脏的肾小管上。尿液中很罕见;当出现肾小管疾病时会增加。微生物正常尿液是无菌的,因此尿液中细菌、酵母和真菌的存在都是异常的。尿液中可发现潜在的感染性微生物,必须确定这些感染是由污染引起的,还是真实感染。如前所述,如果遵循正确的程序采样,几乎完全可以避免污染,但即使正确采集样本,也必须考虑污染的可能性,这取决于是否存在某些线索,如存在泌尿生殖细胞以及潜在的感染物。采样方法应考虑评估感染并排除医源性感染。例如,在无菌的膀胱穿刺标本中,细菌提示膀胱(膀胱炎)或肾(肾盂肾炎)。相比之下,自由采集的菌尿可能是肾脏、膀胱或下生殖道感染;粪便污染也可能导致医源性菌尿。在猫,细菌性膀胱炎应该通过需氧细菌尿培养来确认,因为有下泌尿道症状的猫患细菌性膀胱炎的可能性很低。实际的尿路感染病例会有规律地伴有血尿和蛋白尿,并伴有临床症状。结晶尿液中的结晶较常见,并不总是与疾病有关。除鸟粪石和二水草酸钙外的尿结晶高度提示潜在疾病。管型尿管型(透明,细胞)是由肾小管管腔形成的圆柱形管型。健康动物中,低倍镜下透明管型小于2个,颗粒管型小于1个。尿液管型数量的增加定位于肾脏的疾病过程。脂滴猫科动物尿样中常见脂滴。精子在未绝育雄性动物尿液样本中,精子的存在无特殊意义。大量存在时可能提示导尿或膀胱穿刺中出现逆行射精。尿液分析自动化在评估尿样时,尿样分析通常是一种繁琐且耗时的方法,个体间存在很大的主观性。随着时间的推移,其他需要更仔细检测的体液也被自动化了。然而,异常体液可能需要手动分析,以使开发的某些系统实现过程自动化。在过去的几十年里,更多的定量尿液的具体程序在手动程序促进了更多的自动化,并提高了自动化尿检的专业性。然而,实验室仍然使用人工检测方法,半自动试纸检测作为尿样检测的辅助设备。兽医尿液分析仪的准确度不确定。从自动尿液分析仪获得的胆红素和酮值可能是可靠的,而pH值结果可能不用于临床诊断。在本文发表时,可获得的文献很少,因此,在现阶段,对兽医用自动尿液分析仪的准确性有待评估。4
结论和未来发展
尿液分析是一种安全的筛选试验,可提示大量有关患者健康的信息,因此,它不应被忽视。由于其在采样过程中工作量量大,往往被忽视。全自动尿液分析仪已经在兽医中得到普及,它具有快速、方便的尿液分析功能,但用于临床诊断还不确定。尿液分析是一个高度可靠的指标,肾脏疾病时,需适当进行尿检。它的发现在肾脏疾病的经验性治疗中有重要的应用。样本收集和处理方法在结果和结果的解释中起着关键作用。尿液分析可能是早期识别几种临床症状的关键,可以进行早期干预和提高恢复率。尿液的物理和化学检查的结果是一致的。物理检查尤其包括利用视觉和嗅觉来评估尿液。快速简单的化学试纸条可用于不同的化学成分,但由于不同的影响因素,其结果不容易接受。因此,必须将化学试纸的结果与其他参考实验室方法和患者的临床结果相关联。
尿液分析应被视为对患者进行诊断研究的一个重要部分,但也应作为整体健康检查的一个重要部分,并且应在不考虑患者年龄或总体健康状况的情况下进行。长期以来,尿液分析的方法一直是争论的焦点,因为许多实验都有些武断,不同实验室和专业人员的结果和报告单位也不同。迄今为止,在兽医领域对全自动尿液分析仪的准确度进行评价的工作很少。因此,需要进行更广泛的工作来评价其准确性。这是一个明显的步骤,以标准化的过程中,相同的尿液量可以集中和相同的协议是建立报告结果。如果尿液分析作为临床诊断试验之一被广泛使用,并向科学界表示,这一过程的标准化是可能的。5
原文摘要
校稿/编辑ShirleySU译者:徐彩霞内科、检验科专科医生维特(深圳)医院预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇